【每日课堂】牙科手机传播乙型肝炎病毒的可
牙科手机传播乙型肝炎病毒的可能性探讨
作者:邓小虹孙正乔宏邓宏燕肖潇苏静
使用单位:北京市疾病预防控制中心消毒所
龋齿是口腔科的常见病、多发病,发病率高达80%以上,涉及各年龄段。随着生活水平的不断提高,人们越来越重视口腔的健康,定期洗牙、洁牙的人越来越多。无论是因龋齿就医,还是口腔美容,牙科手机(简称手机)是最常用的口腔器械,手机机头与口腔内唾液、血液、龈沟液和牙菌斑密切接触,使用后的手机机头表面及机头高速涡轮腔内壁、内部狭隙腔及管道内壁上均可受到不同程度的微生物污染,污染还可能通过手机与综合治疗台连接的水、气管道延续,进一步增加血源性疾病传播的机会。急、慢性活动性肝炎患者的血液中含有肝炎病毒,如果不彻底清除手机上被污染的肝炎病毒,手机就可能成为肝炎的传染源。在我国,不同的口腔医疗机械中使用的手机和综合治疗台种类不同,采用的消毒与灭菌处理方法差异较大,为了解由此引起的乙型肝炎病毒(HBV)感染的可能性,我们进行了相关调查及实验,现将结果报道如下:
资料与方法
一、资料
1、医院、二级医院、一级医院各10所,现场调查记录口腔门诊中目前采用的手机消毒与灭菌方式。每所医院随机抽取1个诊室内用于修复、牙周治疗、牙体及牙髓治疗后污染的手机。随机抽取诊室内消毒与灭菌后、在有效期内、使用前的手机。
2、含鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的上海麻鸭血清,核酸杂交DHBVDNA阳性(+++),﹣70℃保存,由中国医学科学院医药生物技术研究所病毒室提供。北京前进种鸭场动物饲养场1日龄北京鸭,DHBVDNA检测均为阴性。安徽庐江鸭DHBVLJ76株全基因克隆质粒(DHBVDNA探针)由中国医学科学院医药生物技术研究所提供。HBsAgELISA检测试剂盒。酶标仪。
二、方法
1、手机HBV污染情况检测:用酶标仪ELISA方法检测每支手机洗脱液中HBsAg抗原性。检测结果:S/N92.1判断为阳性。通过HBsAg抗原性存在与否间接判断HBV污染情况。
2、手机DHBV污染情况:用DHBVDNA强阳性鸭血清20ml滴染手机顶端,将手机37℃恒温干燥30min。将手机顶端浸没于无菌PBS液中,振荡洗脱40s。将1/2份洗脱液直接进行DHBVDNA水平检测,剩余1/2洗脱液分为3等份,每份经胫静脉注射转染1只鸭,雏鸭体温为(39±0.5)℃。本研究中共用DHBVDNA检测阴性的7支手机洗脱液接种7组鸭,每组3只雏鸭。转染后10d取血清检测DHBVDNA水平。将样本点膜,用32P标记DHBVDNA探针进行直接斑点杂交,放射自显影膜片斑点,用酶标仪测定吸光度(A值,A=mm),以杂交斑点A值作为DHBVDNA测定水平。取每组3只雏鸭血清DHBVDNA的平均A值作为该组结果。阳性对照组为DHBVDNA强阳性鸭血清。无菌PBS为阴性对照。
结果
1、手机消毒与灭菌方式:为了解近年来手机消毒与灭菌方式的变化情况,我们于至年,对口腔医疗机构手机消毒与灭菌方式进行了3次调查,结果显示,采用灭菌方式处理使用后手机的比例显著上升,尤其是采用压力蒸汽灭菌的比便上升明显(P0.01),采用擦拭消毒法的比例显著下降(P0.01)。结果见表1.
2、使用后手机HBsAg的检测结果:随机抽取使用后未经过任何处理的手机支,检测其洗脱液中HBsAg抗原性,S/N2.1的仅有2件。抽取的手机(使用后),无论是用于修复,还是用于牙周、牙体及牙髓治疗,均存在严重的血液污染现象。检测结果显示,使用后的手机存在HBsAg污染,但是污染率远远低于文献报道的结果。检测经压力蒸汽灭菌、消毒剂浸泡、表面擦拭消毒等方式处理后的支手机洗脱液中HBsAg的抗原性,结果显示,S/N均2.1。见表2。
HBsAg阳性对照平均S/N值范围为.0~.1,HBsAg阴性对照平均A值范围为0.-0.,试剂盒灵敏度:1微克/L
3、手机DHBV污染情况:经DHBVDNA强阳性鸭血清污染的手机,37℃恒温干燥处理30min后,置无菌PBS液中振荡洗脱40s。对每支手机的1/2洗脱液直接进行DHBVDNA斑点杂交检测,结果均为阴性;将剩余的1/2洗脱液再3等份后分别转染3只鸭,在转染后10d取血清进行DHBVDNA斑点杂交检测,结果均为阳性,3组鸭血清平均A值超过阳性对照组A值,说明经过鸭体内复制后,病毒含量增加。结果见表3。
讨论
HBV是目前世界上流行最广泛的病毒之一,文献报道,全球至少有20亿人曾感染HBV,大约有3亿人携带HBV,其中75%为中国人。HBV感染后可发生急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化及肝癌等。因此,预防、控制HBV感染的发生,对保护人群健康具有重要意义。HBV以血液传播为主。在临床上,HBV主要通过被体液污染的诊疗器械传播。口腔科器械体液污染机会较多、程度较严重,且由于手机的结构特殊,灭菌难度相对较大,因此,口腔科属于医源性感染危险性较高的科室之一。保证口腔器械临床使用的安全性,预防HBV感染是口腔临床医学工作的重点之一。
实施对口腔器械的消毒与灭菌、满足口腔诊疗安全基本需要的前提条件是必须保证临床口腔器械的基本数量,尤其是每台治疗台所配备手机的基本数量。在选择消毒与灭菌方法及设备时,口腔器械的基本数量是重要的参考因素。为此,我们对不同规模的口腔医疗机构目前设备配备情况进行了相关调查。结果显示,医院的器械数量能够满足消毒与灭菌时器械周转的基本需要;综合医院口腔门诊、口腔科及口腔诊所,治疗台及手机的数量随口腔诊室规模的大小,在配备数量上相差较大。有些口腔医疗机械每台治疗台仅配备2支手机,按照我国目前口腔日常门诊就医情况综合考虑,难以满足连续接诊过程中完成对手机灭菌过程所需时间的基本要求;极个别口腔诊所只有1台治疗台,仅有1支手机,难以实现手机的灭菌处理,所以,擦拭消毒基本上成为使用期间手机唯一的消毒手段。
我们对某城市中所有口腔诊所的治疗台和手机数量进行了调查,共调查个诊所,只有1台治疗台、仅配备2支手机的口腔诊所有10个,其中5个口腔诊所对污染的手机采取擦拭消毒;只有1台治疗台、仅有1支手机的诊所有4个,其中2个诊所在诊疗期间对污染的手机不进行消毒处理,另外2个诊所采取擦拭消毒。
手机的消毒与灭菌是控制医源性感染的关键因素之一。目前,欧美发达国家中90%一95%使用压力蒸汽灭菌法对手机进行灭菌。为此,我们于医院感染专业知识、消毒与灭菌技术培训,并对培训前后口腔医疗机构手机消毒与灭菌方式进行调查。结果表明,采用压力蒸汽灭菌法的比例显著上升,从年的27.06%上升至年的84.51%,接近欧美发达国家水平;采取擦拭消毒的比例从年的60%以上,下降到年的10%左右。这一结果说明,专业技医院感染工作中具有非常重要的作用。
手机的微生物污染确实存在,但有些病原体难以查出,尤其是HBV污染情况检测,人们常以HBsAg存在与否间接判断HBV的污染情况。我们采用ELISA方法对手机是否存在HBsAg进行检测,结果表明,手机上唾液、血液等体液污染极为严重,但对支污染的手机检测结果中,仅有2支HBsAg阳性。即使是采用表面擦拭法处理后、手机腔隙内并未得到有效处理的手机,其机头洗脱液HBsAg检测仍为阴性。这些检测数据也正是目前一些口腔医疗机械采用表面擦拭方法处理污染手机的理由及依据。对随机抽取的支手机机头洗脱液中HBsAg进行检测,98.3%均为阴性,这能否说明手机HBV感染机会低于2%,为此,我们采用动物实验进一步验证。
最初国外使用黑猩猩作为实验动物,但黑猩猩来源困难且费用昂贵,难以在国内应用;目前用于嗜肝DNA病毒研究的实验动物主要有东方土拨鼠、鸭和转基因小鼠。我国的家鸭有很高的DHBV感染率,可进行数量较大的研究。因此,我们采用DHBV进行实验,用DHBV人工污染手机后,用其洗脱液转染北京鸭。结果显示,DHBVDNA检测阴性的手机洗脱液接种1日龄北京鸭,7组中有6组A值超过阴性对照,其中3组A值超过转染前血清的A值。
结果表明,在污染剂量低于目前检测方法可检出的最低剂量下限值的情况下,即常规检测结果阴性的情况下,并不能排除感染的可能性。污染剂量尽管很低,但感染机会仍然存在。压力蒸汽灭菌可杀灭一切活的微生物,包括抗性最强的细菌芽孢;能够完全灭活各类病毒,包括HBV。因此,预防控制医源性HBV感染的有效手段是对所有接触破损黏膜或进入无菌组织的口腔器械进行灭菌处理,目前在我国首选的灭菌方式是压力蒸汽灭菌。
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